Equi-phi29 DNA Polymerase是phi29的改造体，并经多次纯化分离而得。在保留了phi29 DNA聚合酶的链置换、连续合成特性（>70kb）的基础上，提高了滚环扩增的反应温度，该酶酶可以在42℃条件下持续的进行DNA合成（而phi29 DNA 聚合酶在此温度下反应活性很低）。
这种高温的反应特性，在以下几个方面对实验有明显的提升：（1）在NGS测序中，其提升了高GC含量、回文结构等复杂模板的延伸能力，使得NGS的覆盖度更均一，降低测序所需深度；（2）高温的反应条件，提升了基因组DNA的WGA产物的合成量，并可以进行变温扩增；（3）降低测序中Gap区域，提升单细胞测序的数据质量和完整度；（4）降低非特异性扩增产物；（5）提升MDA/RCA等实验的扩增性能和特异性。
此外，Equi-phi29 DNA Polymerase仍然具有很强的3’-5’外切酶校读功能，合成的DNA片段保真性高。该酶的外切酶活性较强，因此合成过程中引物需要3’端硫代修饰，以降低外切活性对引物的切割效应。
