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Cas14a1蛋白

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Cas14a1核酸酶是一种内切核酸酶,其在tracrRNA:crRNA(或sgRNA)的引导下,特异结合并切割靶标ssDNA,且无需PAM位点。相比于其他的Cas蛋白,Cas14蛋白的分子量普遍较小(400-700aa);与Cas12类似,Cas14a1也可以结合靶标核酸并激活其ssDNA反式切割活性,从而被应用于靶标核酸的分子检测;与Cas12不同的是,Cas14a1只能结合ssDNA靶标,因此经过扩增富集的靶标核酸需使用T7核酸外切酶进行处理,且其中一条扩增引物需要使用磷硫酰化修饰以确保T7核酸外切酶仅切割其中一条链,从而留下ssDNA靶标链以用于Cas14a1介导的分子检测。

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