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人前列腺癌细胞

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艾碧维
 
产品概述

细胞描述:

du145是从一位有3年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者的脑部转移灶中建立的。该细胞系未检测到激素敏感性,酸性磷酸酶阳性,单个的细胞可在软琼脂中形成集落。对此细胞和原始肿瘤的亚显微结构分析可见微绒毛、微丝、细胞桥粒、线粒体、发达的高尔基体和异质溶酶体。该细胞不表达前列腺抗原。

细胞特性:

1)来源:人,男性,器官:前列腺 疾病:癌 来源之转移灶:脑

2)形态:上皮细胞样,贴壁生长

3)规格:1×106cells

4)培养条件:mem培养基 10优质胎牛血清 1双抗

空气,95;二氧化碳,5%。37℃


细胞接收后的处理:

1)收到细胞后,活细胞首先观察培养瓶是否完好,培养液是否漏液,培养基是否浑浊;冻存细胞是否干冰已挥发完,冻存管盖是否脱落,破碎,若有这类情况,请务必拍照记录,并于收货24h内与我们联系。

2)细胞处理:

复苏的细胞:如果是t-25培养瓶活细胞,收到后请用75的酒精对培养瓶表面进行消毒处理,然后转入培养箱中静置2~3h后再进行后续处理。

备注:运输用的培养基不宜再次用来培养细胞,请按照说明书新配置完全培养基来培养细胞。 &nbsp

冻存细胞:如果是干冰运输的冻存细胞,收到后请立即转入液氮存储或者短暂(24h)放置-80度冰箱保存,或者直接进行细胞复苏。


细胞复苏、传代及冻存流程参考:

1、细胞复苏

1)配制完全培养基:基础培养基 胎牛血清 双抗(特殊培养基特殊配置);

2)细胞复苏:取5ml完全培养基于15ml离心管中,37℃水浴锅预热,从液氮管(或者-80度冰箱)中快速取出冻存的细胞,放入37℃水浴锅中,摇晃使快速化冻(1min左右),然后将化冻的细胞和预热的培养基,移入超净工作台中,化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3)吸弃上清,得到细胞沉淀,用2ml完全培养基轻轻重悬细胞,加入到t25培养瓶中,做好标记,放入37℃,5co2饱和适度培养箱中培养(培养皿复苏效果更好);

4)24h后,观察细胞贴壁情况(未贴壁的即为死细胞针对贴壁细胞),吸弃旧培养基,加入新鲜的预热(室温或37℃)的完全培养基,继续培养。

2、细胞传代

1)待细胞生长到80-90汇合度时,吸弃旧的培养基,加入1ml无菌pbs润洗一次,以去除残余的培养基及血清(血清含有胰酶的抑制因子),然后加入1ml 0.25胰酶,37℃培养箱中消化(1~2min左右,不同细胞消化时间不同),取出细胞,镜下观察细胞至细胞皱缩变圆;

2)加入1ml完全培养基(含fbs)终止消化,轻轻拍打,使细胞脱落下来成单个细胞悬液,收集细胞于15ml无菌离心管中,1000rpm,离心5min;

3)收集细胞沉淀,完全培养基重悬,一分为二(可根据细胞生长速度调整比例),分别加入到2个新的培养瓶中,做好标记,放入培养箱中培养。

3、细胞冻存

1)按照细胞传代方法,在超净工作台内消化收集细胞沉淀,取少量细胞用于计数;

2)用预冷的1ml冻存液(90完全培养基 10dmso)或者无血清细胞冻存液重悬细胞,加入到1.2ml冻存管中,密度为1*106个/ml。

3)放入程序冻存盒,-80℃过夜后,转入液氮长期保存。



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